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[导读]在下述的内容中,小编将会对基因芯片的相关消息予以报道,如果基因芯片是您想要了解的焦点之一,不妨和小编共同阅读这篇文章哦。

在下述的内容中,小编将会对基因芯片的相关消息予以报道,如果基因芯片是您想要了解的焦点之一,不妨和小编共同阅读这篇文章哦。

一、基因芯片技术原理

基因芯片技术是生物芯片的一种,它是生命科学领域里兴起的一项高新技术,它集成了微电子制造技术、激光扫描技术、分子生物学、物理和化学等先进技术。

基因芯片技术的原理主要如下:

1、DNA探针的大量收集和纯化,基因芯片探针制备方法可以是根据基因设计特异性的PCR引物,对基因进行特异性地扩张,也可以是建立均一化的cDNA文库,通过克隆鉴定、筛选、扩增产生;

2、将纯化后的探针固定在片基上,首先要将基片(主要用的是玻璃片)进行特殊的化学处理,使玻璃片醛基化或氨基化,然后将纯化的探针通过显微打印或喷打在基片上,再将打印好的玻璃片进行后处理,如水合化、加热或紫外交联等;

3、样品的标记,标记的方法一般是采用逆转录法或随机引物延伸法等;

4、杂交后芯片的扫描、图像处理的采集和数据分析。

二、基因芯片研究方向及当前面临的困难

通过上面的介绍,想必大家对基因芯片技术的原理已经具备了初步的认识。在这部分,我们主要来了解下基因芯片的研究方向以及在当前环境下基因芯片的发展所面临的困难。

尽管基因芯片技术已经取得了长足的发展,得到世人的瞩目,但仍然存在着许多难以解决的问题,例如技术成本昂贵、复杂、检测灵敏度较低、重复性差、分析泛围较狭窄等问题。这些问题主要表现在样品的制备、探针合成与固定、分子的标记、数据的读取与分析等几个方面。

样品制备上,当前多数公司在标记和测定前都要对样品进行一定程度的扩增以便提高检测的灵敏度,但仍有不少人在尝试绕过该问题,这包括 Mosaic Technologies 公司的固相 PCR 扩增体系以及 Lynx Therapeutics 公司提出的大量并行固相克隆方法,两种方法各有优缺点,但目前尚未取得实际应用。

探针的合成与固定比较复杂,特别是对于制作高密度的探针阵列。使用光导聚合技术每步产率不高( 95% ),难于保证好的聚合效果。应运而生的其它很多方法,如压电打压、微量喷涂等多项技术,虽然技术难度较低方法也比较灵活,但存在的问题是难以形成高密度的探针阵列,所以只能在较小规模上使用。最近我国学者已成功地将分子印章技术应用于探针的原位合成而且取得了比较满意的结果(个人通讯)。

目标分子的标记也是一个重要的限速步骤,如何简化或绕过这一步现在仍然是个问题。

目标分子与探针的杂交会出现一些问题:首先,由于杂交位于固相表面,所以有一定程度的空间阻碍作用,有必要设法减小这种不利因素的影响。 Southern 曾通过向探针中引入间隔分子而使杂交效率提高于了 150 倍。其次,探针分子的 GC 含量、长度以及浓度等都会对杂交产生一定的影响,因此需要分别进行分析和研究。

信号的获取与分析上,当前多数方法使用荧光法进行检测和分析,重复性较好,但灵敏仍然不高。正在发展的方法有多种,如质谱法、化学发光法等。基因芯片上成千上万的寡核苷酸探针由于序列本身有一定程度的重叠因而产生了大量的丰余信息。这一方面可以为样品的检测提供大量的验证机会,但同时,要对如此大量的信息进行解读,目前仍是一个艰巨的技术问题。

最后,小编诚心感谢大家的阅读。你们的每一次阅读,对小编来说都是莫大的鼓励和鼓舞。最后的最后,祝大家有个精彩的一天。

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