分光光度计光谱范围是多少?如何使用紫外可见分光光度计?
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分光光度计是测量仪器,通过分光光度计,我们能够对光进行分解。为了增进大家对分光光度计的认识,本文基于两点介绍分光光度计:1.分光光度计的光谱范围、2.紫外可见分光光度计的使用。如果你对分光光度计具有兴趣,不妨继续往下阅读哦。
一、分光光度计光谱范围
分光光度计,又称光谱仪(spectrometer),是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的380~780nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源。
包括波长范围为400~760 nm的可见光区和波长范围为200~400 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。
钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的400~760nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红橙,黄绿,蓝靛,紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源。
氢灯(或氘灯)的发射光谱:氢灯能发出185~400 nm波长的光谱可作为紫外光光度计的光源。
物质的吸收光谱:
如果在光源和棱镜之间放上某种物质的溶液,此时在屏上所显示的光谱已不再是光源的光谱,它出现了几条暗线,即光源发射光谱中某些波长的光因溶液吸收而消失,这种被溶液吸收后的光谱称为该溶液的吸收光谱。
不同物质的吸收光谱是不同的.因此根据吸收光谱,可以鉴别溶液中所含的物质。
当光线通过某种物质的溶液时透过的光的强度减弱,因为有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光被组成此溶液的物质所吸收只有一部分光可透过溶液。
入射光= 反射光 + 分散光 + 吸收光 + 透过光。
如果我们用蒸馏水(或组成此溶液的溶剂)作为"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的损失则:
入射光 = 吸收光 十 透过光
二、紫外可见分光光度计
(一)什么是紫外可见分光光度计
紫外可见分光光度计是分光可见光度计的一种。是一种利用物质对光的吸收性原理而设计制作的一种分析仪器,常用来进行定性分析、纯度检查、结构分析、络合物组成及稳定常数的测定、反应动力学研究等。根据所测定波长的范围,分光光度计可分为紫外分光光度计、可见光分光光度计和红外分光光度计等几种。
紫外-可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理,利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。光源的功能是提供足够强度的、稳定的连续光谱。紫外光区通常用氢灯或氘灯.见光区通常用钨灯或卤钨灯。单色器的功能是将光源发出的复合光分解并从中分出所需波长的单色光。色散元件有棱镜和光栅两种。可见光区的测量用玻璃吸收池,紫外光区的测量须用石英吸收池。检测器的功能是通过光电转换元件检测透过光的强度,将光信号转变成电信号。常用的光电转换元件有光电管、光电倍增管及光二极管阵列检测器。分光光度计的分类方法有多种:按光路系统可分为单光束和双光束分光光度计;按测量方式可分为单波长和双波长分光光度计;按绘制光谱图的检测方式分为分光扫描检测与二极管阵列全谱检测。
(二)紫外可见分光光度计仪器使用流程
1. 使用具有接地功能的电源,接通紫外可见分光光度计电源
2. 打开开关预热20分钟左右,等待仪器完成自检。
3. 设置测试方式:透光率、吸光度、浓度数据、波长等。
4. 放置样品:打开样品室盖,在1~4号放置比色皿槽中,依次放入校具、参比液、样品液1和样品液2;
5. 校具校"0.000":将校具置入光路,在T方式下按"%T"键,此时仪器自动校正后显示"0.000";
6. 参比液校"100"%T或"0.000"A:将参比液拉入光路中,按"0A/100%T"键调0A/100%T,此时仪器显示"BLA",表示仪器正在自动校正,校正完毕后显示"100"%T或"0.000"A后,表示校正完毕,可以进行样品测定.
7. 样品测定:将两样品液分别拉入光路中,此时若在"T"方式下则可依次显示样品的透射比(透光度)若在"A"方式下,则显示测得的样品吸光度。
8. 使用完毕关上电源。清洁比色皿。
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