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[导读]生化分析仪采用的光源一般是发射宽波段范围的连续辐射,然而,在实际测量时,我们希望采用窄谱带或单色光,这是由于:①采用窄带辐射才有可能将彼此非常接近的吸收带分开;②采用窄带才可能在最大吸收波长处进行测量

生化分析仪采用的光源一般是发射宽波段范围的连续辐射,然而,在实际测量时,我们希望采用窄谱带或单色光,这是由于:①采用窄带辐射才有可能将彼此非常接近的吸收带分开;②采用窄带才可能在最大吸收波长处进行测量,从而提高测定灵敏度;③在定量分析时,采用窄带才能较好地遵守比尔定律。因此,必须采用适当的装置将宽波段复合光分解为窄带或单色光。单色器是使不同波长的光以不同的角度发散的组件,按色散元件的不同,可分为棱镜单色器、光栅单色器和滤光片式单色器。

  棱镜单色器简单叉便宜,但其色散是弯曲且非线性的,长波色散率较小,短波色散率较高,因此欲得到相同的光谱强度,狭缝宽度要随波长而改变,并且光谱线间隔不同为非匀排光谱。

  光栅的色散率大,色散角与波长成线性关系,分辨率高,光谱范围宽。采用光栅的仪器设计时须注意光谱叠级,检测灵敏度及光学布局(前分光或后分光)等因素的影响。光栅的主要缺点是有次级光谱干扰分析,且杂散光的影响较大,光栅的价格昂贵。

  滤光片是一种简单而廉价的波长选择器,其作用是选择性地透过一定波长范围的光。滤光片的滤光特性用最大透光波长(中心波长)和谱带半宽度(有效带宽)来描述。最大透光

  波长是指在该波长处辐射有最大透光率,而谱带半宽度是指最大透光率的一半处谱带的波长范围(见图1 ),以纳米(nm)表示,谱带半宽度越小,贝刂单色光的纯度越高,一般滤光片的谱带半宽度为10 nm。

  检验的准确度与单色光的纯度是有很大关系的,所以,应选择半宽度较小的窄带滤光片。同时,为了能够得到较好的紫外光强度(340 nm),我们选择了透过率较高的滤光片。而为了不使578 nm和630 nm处得到的光强度溢出计算范围,选择了透过率较低的滤光片(见表1)。

  图1 谱带半宽度

  滤光片的透光特性随着温度的变化而变化,温度升高时,不但它的半宽度会加宽,峰值波长也会起变化。因此在光源灯和滤光片装置比较接近的光学系统中,使用隔热玻璃挡在灯泡和滤光片之间。在安装光源灯时需要注意,别让它与隔热玻璃直接接触,以减少导热。

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