基因扩增仪工作原理与不同类型应用领域
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PCR仪即基因扩增仪,主要是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。其原理为利用升温使DNA变性,用限制性内切酶使DNA双链解链,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基因复制的目的。
PCR仪的反应,主要是先将DNA加热变性, 将双股的DNA加热后转为单股DNA以做为复制的模板。 再将Primers冷却至55~60℃,附着于模板DNA两端,最后在DNA聚合酶e.g. Taq-polymerase 的作用下加热,进行引物的延长及DNA的合成。
PCR仪目前按照扩增的目的和检测的标准,主要分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪等。普通PCR仪要做不同的退火温度需要多次运行,梯度PCR仪可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度),通常有12种温度梯度进行扩增。原位PCR仪用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪。实时荧光定量PCR仪增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统得出量化的实时结果输出。
PCR技术被广泛地应用于生命科学研究、食品卫生、医疗、法医及环境监测等诸多方面,包括科研、临床、用户试剂、进口试剂、定性或定量等各种条件要求的PCR实验。